蛋白质糖基化是指糖基转移酶作用下，糖类化合物与蛋白质上的氨基酸残基形成糖苷键，将糖类化合物连接到蛋白质的过程。该过程从内质网开始，经过一系列修饰作用，最终在高尔基体完成。经过糖基化修饰的蛋白质被称为糖蛋白。

糖基化对生物制品的疗效、稳定性和免疫原性具有重要影响。寡糖谱和糖链结构是评估生物制品特性的重要指标。寡糖参与蛋白质折叠、信号传导等细胞过程，与蛋白质结合形成糖蛋白。糖蛋白常位于细胞表面，参与细菌、病毒的识别和凝集素等蛋白质的相互作用，对生物制品的正常功能至关重要。

寡糖的非模板合成和树状结构使得其结构解析变得困难。为解决这一问题，百泰派克生物科技BTP开发了一系列稳定且高效的液相色谱高分辨质谱（LC-MS/MS）表征方法。这些方法涵盖了从糖链分析到糖基化位点鉴定，再到糖肽解析的完整分析流程，能够准确分析寡糖的结构，为糖基化研究提供了强大的工具和技术支持。以下是基本流程图：

图1糖基化分析流程图

生物制品完整糖基化分析

糖基化肽段是指糖链连接在肽段上的形式，包含了肽段的氨基酸信息、完整的糖链信息以及糖链和肽段结合位点的信息。为了实现对特定糖蛋白完整意义上的糖基化分析，百泰派克生物科技BTP基于液质联用的高分辨质谱平台开发了相应的分析方法。通过这些方法，我们可以获取以下信息：

• 糖基化位点的定位，即蛋白质中哪些位点发生了糖基化修饰；

• 区分N糖基化位点和O糖基化位点，以确定糖链修饰的类型；

• 获取每个N糖基化位点对应的糖链组成、结构和相对含量信息；

• 获取每个O糖基化位点对应的糖链组成和相对含量信息；

• 对上述信息进行统计和总结，以便进一步分析和解释糖蛋白的糖基化特征。

这些分析结果将有助于我们深入了解糖蛋白的糖基化修饰情况，为研究糖蛋白的功能和生物学意义提供重要的信息。

实验仪器

• NanoLC: Vanquish NEO

• MS: Orbitrap Fusion Lumos With ETD

实验结果展示

1.糖基化修饰类别

表1 糖基化修饰类型统计

注：Type：糖基化修饰类型；Position：糖基化位点在蛋白中的位置；Glycans NHFAGNa：糖基化修饰的糖型；Modification Type(s)：糖型的分子量；Score：蛋白打分值；Intensity：蛋白的相对丰度；Percentage %：该种糖型在各自对应的位点的总糖型中所占的比例。

2.糖基化位点修饰效率

图2 糖基化效率统计图

注：糖基化效率（%）= * 100

3.每一个糖基化位点各种糖型比例

图3 糖型比例

注：图中为某一位点含有的N糖糖型和占比，横坐标为糖型，纵坐标为糖型的占比

4.蛋白糖基化修饰信息汇总图

图4 糖基化信息汇总

注：图中为每个位点上含量前三的糖

百泰派克生物科技特色项目

一、蛋白测序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos质谱仪及岛津公司埃德曼降解测序系统对蛋白质序列进行分析，提供基于质谱的蛋白测序分析服务，包括对蛋白质的氨基酸组成分析，N端测序，C端测序和全序列分析，以及基于埃德曼降解的蛋白质N端序列分析服务。对于未知理论序列的蛋白质，提供基于从头测序法的蛋白质从头测序服务，对蛋白序列进行分析。

※服务优势：

1.采用目前世界上先进的质谱仪器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可实现对所测定靶蛋白序列 100% 的覆盖;

3.可测定蛋白N端多达 70个氨基酸序列;

4.可测定多种形式的样品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白条带;

5.样品用量低: 蛋白样品仅需 5-10ug，即可完成检测;

6.测序不受N端封闭，PEC和和糖基化等N端修饰的影响。

二、蛋白质组学

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC，提供定量蛋白质组学、靶向蛋白质组学、多肽组学、翻译后修饰蛋白组学等多种蛋白质组学分析服务。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白质组学服务，助力微量样本蛋白组学、大样本群医学及高通量修饰组学等研究工作。

※服务优势：

1 .高通量定量蛋白分析:多对照组大规模实验分析，发现新的生物标记物;

2.体内体外多种蛋白质标记方法，适用于分析组织、细胞、血液等多种样品;

3.质谱分析灵敏度高，实验结果重复度高;

4.可检测较低丰度蛋白，线性范围广;

5.专业生物信息学分析，分析更系统准确。

三、单细胞质谱流式技术分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm质谱流式系统进行单细胞质谱流式技术分析，采用金属元素标记物（通常是金属元素标记的特异抗体）标记细胞表面和内部的分子，然后用流式细胞原理分离单个细胞，再用电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）分析单个细胞的原子质量谱，最后将原子质量谱数据转换为细胞表面和内部的信号分子表达量。

※服务优势：

1.技术先进，填补技术空白

采用金属标记抗体技术，避免了传统流式荧光通道少且易相互影响的问题。可在单细胞层面上对多种指标同时进行表征，百泰派克生物科技可做到同时检测51个目标蛋白。

2.分析数量大，成本较低

单细胞RNAseq受成本等因素限制，所有样本细胞汇总的分析数目一般在2x10^4个左右，而流式质谱技术一次（单样本）就可分析至少10^5的细胞，实现了数量级的提高，且成本不高于单细胞RNAseq。

3.应用前景大

①流式质谱结果可以给出细胞亚群的变化，在临床诊断、疾病机制研究等方面具有极大的研究前景；

②将金属标签技术与其他技术结合会有新应用方向。除常规蛋白外，质谱流式细胞技术还可用于蛋白翻译后修饰；

③可检测细胞存活率、细胞大小、mRNA转录子表达量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现

百泰派克生物科技的基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现一站式解决方案包括我们专有的、高度敏感的免疫肽富集和鉴定方案。我们能够帮助您实现10,000个以上I型多肽和10,000个以上II型多肽的鉴定和识别。通过我们优化的高通量免疫多肽组学分析平台进行免疫肽组学分析，可从最小的样品材料中进行可重复的识别和定量。该服务可以应用于大规模的研究，旨在助力科研工作者寻找癌症、免疫疾病及传染病的解决方案，深入挖掘未知的靶标。

五、生物药物表征

百泰派克基于高分辨率质谱技术，MALDI TOF，高效色谱分离技术，提供一系列完善的生物药物分析方案，从蛋白质、多肽、抗体、疫苗等生物制品的氨基酸组成和一级结构分析，到产品变异性和纯度分析。旨在提供优质生物药物分析服务，帮助生物医药生产商提高生物药物品质。

百泰派克生物科技七大检测平台

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物质谱多组学优质服务商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于为生物/制药和医疗器械行业提供质量控制检测和项目验证等专业服务。公司实验室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法规和指导原则，通过CNAS/ISO9001双重质量体系认证，建立了完备的质量体系，数据冷热/异地备份，设备定期计量/期间核查，软件审计追踪，为客户提供一体化解决方案和技术服务，支持新药研发、药物申报注册和生产放行。

1.公司采用ISO9001质量控制体系，专业提供以质谱为基础的CRO检测分析服务；

2.获国家CNAS实验室认可，为客户提供符合全球药政法规的药物质量研究服务；

3.业务范围覆盖蛋白质组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等；

4.七大质量控制检测平台，满足您一站式服务需求；

5.服务3000+企业，10000+客户的选择；

6.致力于为您提供优质的生物质谱分析服务!

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